公司新闻 | 弧菌检测操作说明
弧菌是菌体短小，弯曲成弧形，尾部带一鞭毛的革兰氏阴性菌。弧菌属广泛分布于河口、海湾、近岸海域的海水和海洋动物体内。
弧菌是目前南美白对虾养殖的头号杀手，危害极大，学习如何采用“弧菌检测套装”进行弧菌的快速有效检测显得非常必要。
原理
“弧菌检测套装”适合于弧菌的显色观察，一定量的被测试水样或组织样品，均匀的涂抹在制备好的培养皿上，培养一定的时间后显示出明显可见的色斑，经过计数，计算出水体中每毫升弧菌的数量，也可定量判断动物组织中（如肠道、肝胰脏）中的弧菌含量。每份套装包括：真空包装的培养皿、无菌滴管、无菌涂棒。
操作方法
培养皿：开封使用前应保存于阴凉处，有条件最好冷藏（4℃）保存。
测试样操作（最好在超净台或比较干净的环境中进行，戴上卫生手套避免污染干扰）：用滴管取养殖水样（每个滴管用一个水样），滴加到培养皿上3滴（共约0.1mL），然后用L型涂棒（每个涂棒用一个水样）涂抹均匀，加盖，平放1-2小时后倒置。最好置于26 ℃恒温培养箱中培养。
如果需要测定特定组织中（如肝胰腺、肠道）中的弧菌数量，则需要取一定数量的该组织，放在装有无菌生理盐水的小管中匀浆，然后按照上述步骤培养和计数。
弧菌计数：显色后的培养皿上出现可见的颜色和直径有区别的色斑，是不同弧菌特性的显色表现，通过计数每个平板上的平均色斑，再乘以10，即可计算出水样中的弧菌数量(个/mL)。如果对结果存疑，可将一个水样平行做三个培养基，取计数的平均值。
指标判定
一般养殖水体中弧菌低于100 个/mL一般被认为是安全指标，而超过1000个/mL时，就很容易出现大面积发病，因此，将总弧菌数1000个/mL作为警示指标。据实际观察，在合适的温度和有机质比较丰富的水体中，弧菌数量由500个/mL到1000个/mL只需要2天的时间，所以，控制弧菌数量应该在500个/mL或更低的时候进行。
特别提示
近年在各地爆发的“急性肝胰脏坏死综合症AHPNS”,多数认为病原为副溶血弧菌或与其密切相关，而副溶血弧菌在本培养皿上呈绿色菌落，监控时应格外注意，一般要求绿色菌落最好不要超过30-50个/mL。
应用案例
首先，在放苗前三天应检测水体中的弧菌数量，根据结果进行必要的处理，以确保水体安全。其次，南美白对虾在养殖20天后，随着生长和投饵量迅速的增加，产生大量的有机废物，超出了水体自身的净化能力，给弧菌营造了适宜的营养温床，使对虾容易感染弧菌疾病，表现黑鳃、黄鳃、黑斑、红肢、烂眼、短须、空肠空胃等症状，会出现大量的游塘、趴边和死亡。建议在养殖过程每周检测水体中弧菌量，当弧菌数量上升至300个/mL时，提前用绿色杀菌剂和微生物制剂配合处理，能维持弧菌量在较低的水平和较长的周期；如果超过500个/mL，则最好先使用消毒剂，2天后使用微生态制剂；维持水质，严格控制弧菌量在1000个/mL以下。特别在养殖30天以后，更应注意弧菌数量的变化，做到预防为主。
（饲料事业部 潘恒伟）